本作主人公“殺手先生”（櫻井孝宏 配音）是一名職業(yè)殺手，只要接到委托就什么都殺，甚至是自己的父母或者是小學(xué)生的暑假作業(yè)。他有個弟子，是父母雙亡的小學(xué)生，因為崇拜殺手先生而拜其為師。登場人物還有要向殺手先生報殺父之仇的17歲巨乳美少女、與殺手先生有多次近距離接觸的警長、一條名為“五郎”的警犬。本動畫每集篇幅為3分鐘，充滿了大量令人捧腹的冷笑話，可以說是以殺手先生為中心的冷笑話集錦。殺手先生雖然長相帥氣，為人冷酷，實際上是個冷面笑匠，與美少女、警長等角色的接觸中，產(chǎn)生各種超乎意料的搞笑橋段。
本動畫改編自TAMACHIKU創(chuàng)作的四格漫畫。
新田日和 八木侑紀 高橋未奈美 石原夏織 小倉唯 飯?zhí)锢锼?nbsp;鈴木愛奈 德井青空 加藤英美里 五十嵐裕美 潘惠美 諏訪彩花 三森鈴子 松田利冴 沼倉愛美
大久保瑠美 下野纮 中村悠一 中原麻衣 增田俊樹 中島卓也 井上雄貴 大塚剛央 山谷祥生 手冢弘道 堤雪菜 小坂井祐莉繪 田丸篤志 富田美憂 二之宮愛子 大野智敬 鐮倉有那 高坂篤志 游佐浩二 藤原啟治
石田彰 豐口惠美 鳥海浩輔 田中理惠 綠川光 能登麻美子 田之中勇 澤城美雪 中井和哉 堀秀行 野島健兒 種崎敦美 三浦祥朗 小松由佳 市道真央 小巖井小鳥 Lynn 石谷春貴 大久?，娒?nbsp;三宅麻理惠 櫻川惠 高橋伸也
岡咲美保 古川慎 千本木彩花 市道真央 江口拓也 大塚芳忠 柳田淳一 山本兼平 泊明日菜 小林親弘 山口太郎 福島潤 大久?，娒?nbsp;田中理惠
梶裕貴 石川由依 井上麻里奈 三上枝織 下野纮 小林優(yōu) 谷山紀章 細谷佳正 樸璐美 神谷浩史 子安武人 花江夏樹 佐倉綾音 沼倉愛美 增田俊樹 村瀬步 松風(fēng)雅也 小野賢章 榎木淳彌 渡邊明乃 齋賀光希 井上和彥 齊藤次郎 花輪英司