影片講述了新生代蜘蛛俠邁爾斯（沙梅克·摩爾 Shameik Moore 配音）攜手蜘蛛格溫（海莉·斯坦菲爾德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒險(xiǎn)征程的故事。面臨每個(gè)蜘蛛俠都會(huì)失去至親的宿命，邁爾斯誓言打破命運(yùn)魔咒，找到屬于自己的英雄之路。而這個(gè)決定和蜘蛛俠2099（奧斯卡·伊薩克 Oscar Is aac 配音）所領(lǐng)軍的蜘蛛聯(lián)盟產(chǎn)生了極大沖突，一場(chǎng)以一敵百的蜘蛛俠大內(nèi)戰(zhàn)即將拉響！
凱瑟琳·巴爾 Natasha Calis Anna Cummer Kelly Metzger 凱莉·謝里丹 Tabitha St. Germain Cathy Weseluck
丹·卡斯泰蘭尼塔 朱莉·卡夫娜 南茜·卡特萊特 雅德麗·史密斯 漢克·阿扎利亞 哈里·謝爾 潘蜜拉·海登 露西·泰勒 麥琪·羅絲威爾 特蕾絲·麥克尼爾 瑪西婭·華萊士 卡爾·維耶德戈特 馬丁·辛 皮波士·芬克爾 喬·納馬斯 邁克·喬吉 揚(yáng)·霍克斯 安德列·馬丁 菲爾·哈特曼 亞歷克斯·崔貝克 喬治·哈里森 吉姆·法尼 詹姆斯·厄爾·瓊斯 詹妮安·加羅法洛 博卡·格德斯維特 小漢克·威廉姆斯 杰·雷諾 海倫·亨特 鮑勃·登佛 羅德·斯泰格爾 蘭迪·瓊斯 保羅·溫菲爾德 史蒂夫·馬丁 博諾 亞當(dāng)·克萊頓 小拉
丹·卡斯泰蘭尼塔 朱莉·卡夫娜 南茜·卡特萊特 雅德麗·史密斯 漢克·阿扎利亞 哈里·謝爾 潘蜜拉·海登 露西·泰勒 麥琪·羅絲威爾 特蕾絲·麥克尼爾 瑪西婭·華萊士 卡爾·維耶德戈特 艾伯特·布魯克斯 菲爾·哈特曼 邁克爾·巴佛 保羅·溫菲爾德 魯?shù)履帷さ煞茽柕?nbsp;喬恩·拉威茨 約翰尼·卡什 倫納德·尼莫伊 大衛(wèi)·杜楚尼 吉蓮·安德森 杰克·萊蒙 喬·曼特納 阿歷克斯·羅克 約翰·沃特斯 凱爾希·格蘭莫 戴維·海德·皮爾斯 戴夫·托馬斯 弗蘭克·維爾克 布萊特·哈特 丸山凱倫 渡邊戈登 夏野薩博 蒂姆·